CellHome程序降溫盒主要用于細胞冷凍、保存過程，直接放在超低溫冰箱中可以提供-1℃/min的降溫速率。這對絕大多數(shù)細胞凍存來說是非常理想的，而且產(chǎn)品本身不需要任何添加物，是滿足現(xiàn)代實驗室環(huán)保的目標而開發(fā)的質(zhì)量產(chǎn)品?，F(xiàn)狀：現(xiàn)在大多實驗室使用的產(chǎn)品主要是通過添加異丙醇（微毒，極易揮發(fā)）等有機溶劑來輔助降溫，故而存在以下不足：1、微毒的異丙醇會揮發(fā)污染實驗室環(huán)境；2、使用幾次后，需添加或更換異丙醇，會產(chǎn)生持續(xù)的購買成本和處理危險品的費用，并且頻繁的更換會給使用帶來麻煩，甚至可能污染細胞；3，南寧低溫凍存盒規(guī)格、由于盒子本身是用塑料做的，南寧低溫凍存盒規(guī)格，南寧低溫凍存盒規(guī)格，在低溫冰箱中拿出來時要戴防護手套（否則易）且不易打開（被冰凍住了）；4、冷凍管冷凍不均勻等。杭州科默斯科技有限公司期待著與志同道合的同仁精誠合作。南寧低溫凍存盒規(guī)格

現(xiàn)有的細胞梯度凍存盒的使用，在凍存細胞前，先將盒子里的凍存管支架取出，往盒中加入有機溶劑，再把支架放回盒中，再把整個盒子預冷，凍存時，把裝有細胞的凍存管放入凍存盒里，蓋子擰好，逐步降溫，從4℃降到-20℃，再降到-80℃，然后取出凍存盒，打開蓋子，將細胞取出放入液氮中保存?，F(xiàn)有細胞梯度凍存盒具有以下缺點：當把支架放回盒中之后，當要再擰開蓋子時，盒內(nèi)裝有的有機溶劑容易漏出來，尤其是要將存放在-80℃的凍存盒里的細胞取出移至液氮罐中時，凍存盒的蓋子由于在零下低溫放置，導致很難擰開，用力擰開蓋的話，就更容易導致盒內(nèi)裝有的有機溶劑漏出。南寧低溫凍存盒規(guī)格杭州科默斯科技有限公司改善提高，永無止境。

經(jīng)驗2：我們實驗室凍存盒平時放4度，需要凍細胞時直接拿出來用就可以了。第二天轉(zhuǎn)移至液氮，貴重的細胞盡快轉(zhuǎn)移，不然會影響復蘇成活率的。一般是用5次就更換一下異丙醇?，F(xiàn)在也有一些商品化凍存液可以直接丟進-80的，很方便，效果也不錯的。經(jīng)驗3：異丙醇的量是要保證的，不能低于表明的線，否則不能起到很好的程序性降溫作用，我們是在4度放置，放了細胞后立馬放到-80度冰箱，第二天再轉(zhuǎn)移到液氮，效果很不錯。異丙醇熔點：-87.9度的色透明具有乙醇氣味的可燃性0液體。注意了有可燃性!急性毒性：口服- 大鼠 LD50: 5840 毫克/ 公斤; 口服- 小鼠 LC50: 3600 毫克/ 公斤。刺激數(shù)據(jù)：眼睛- 兔子100 毫克/ !請注意清理!

細胞凍存有兩種方法：傳統(tǒng)的方法是利用冷存管處于4℃、 -20℃、 -80℃保存，程序降溫方法是利用程序降溫盒設定程序由室溫降低至-80℃，后再放置到液氮槽中長期保存。程序降溫盒的使用注意事項如下：實驗室雖然有程序降溫凍存盒，但怎么使用一直都搞不明白，我覺得是不是應該把程序降溫凍存盒先從-80度移到室溫放一段時間(細胞剛開始還沒凍的時候就是室溫)，然后把細胞放進去，再一起移到-80度，這樣才能實現(xiàn)程序降溫呢? 時間使用長了，感覺里面的液體是不是異丙醇啊，使用時間長了會不會揮發(fā)或變質(zhì)什么的，要不要添加或維護一下呢，還有有一只降溫盒因不小心給傾斜讓液體流出了部分，要補充嗎?經(jīng)驗1：凍存盒外表面有刻度的吧，異丙醇液面要高于較低線。杭州科默斯科技有限公司規(guī)范運作、持續(xù)創(chuàng)新。

凍存盒肯定是先放在室溫，然后放進去細胞，置于-80，利用異丙醇實現(xiàn)梯度降溫啊。)

根據(jù)論壇里的討論，異丙醇使用過一段時間后是要更換的，但是我一直沒換過，也沒發(fā)現(xiàn)很大問題。

經(jīng)驗2：我們實驗室凍存盒平時放4度，需要凍細胞時直接拿出來用就可以了。第二天轉(zhuǎn)移至液氮，貴重的細胞盡快轉(zhuǎn)移，不然會影響復蘇成活率的。一般是用5次就更換一下異丙醇?，F(xiàn)在也有一些商品化凍存液可以直接丟進-80的，很方便，效果也不錯的。

經(jīng)驗3：異丙醇的量是要保證的，不能低于表明的線，否則不能起到很好的程序性降溫作用，我們是在4度放置，放了細胞后立馬放到-80度冰箱，第二天再轉(zhuǎn)移到液氮，效果很不錯。異丙醇熔點：-87.9度的色透明具有乙醇氣味的可燃性0液體。注意了有可燃性!急性毒性：口服- 大鼠 LD50: 5840 毫克/ 公斤; 口服- 小鼠 LC50: 3600 毫克/ 公斤。刺激數(shù)據(jù)：眼睛- 兔子100 毫克/ !請注意清理!

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箱中孵育 2-4min；

孵育完成后在倒置顯微鏡下觀察細胞是否變圓飄起，如還有部分細胞為消化下

可在生物安全柜內(nèi)用移液管吸起消化液，吹打培養(yǎng)平面；

向消化下細胞的培養(yǎng)瓶中加入 1ml 含血清的完全培養(yǎng)基終止消化，然后將培養(yǎng)

瓶中的液體轉(zhuǎn)入 15ml 離心管中，300g 離心 5min；

離心完成后，棄上清，用 0.5mlFBS 重懸細胞，再加入 0.5ml 凍存液，用移液

管充分混勻，之后轉(zhuǎn)入 1.8ml 凍存管中；

將凍存管轉(zhuǎn)入填充滿異丙醇的程序降溫盒中，之后轉(zhuǎn)入-80℃冰箱中過夜降溫；

第二天，取出降溫完成的序降溫盒中的凍存管，盡快轉(zhuǎn)入液氮罐中保存。 南寧低溫凍存盒規(guī)格

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