在本實用新型一實施例中，所述冷凍管槽21的深度與存放的凍存管高度相同。

在本實用新型一實施例中，在所述加液管5的頂部安裝擰蓋6。擰蓋平時與加液管為連接狀態，防止有機溶液從加液管漏出。

在本實用新型一實施例中，所述擰蓋6的上端與水平面平行。

在本實用新型一實施例中，所述擰蓋6為圓柱體，所述擰蓋6內部設有內螺紋，所述加液管上端設有外螺紋，所述擰蓋6與加液管5螺紋連接。螺紋連接緊固且易打開。

以上所述*為本實用新型的較佳實施例而已，并不用以限制本實用新型，凡在本實用新型的精神和原則之內，浙江低溫凍存盒多少錢，所作的任何修改，浙江低溫凍存盒多少錢、等同替換等，浙江低溫凍存盒多少錢，均應包含在本實用新型的保護范圍之內。

杭州科默斯科技有限公司顧客的微笑是我們不懈的追求。浙江低溫凍存盒多少錢

所需儀器：

-86℃超低溫冰箱

離心機

生物安全柜

電動移液器

CO2培養箱

倒置顯微鏡

液氮罐

所需試劑：

胎牛血清（FBS）

細胞培養級 DMSO

凍存液：80%FBS+**MSO

無菌 1×PBS pH=7.2

消化液：0.25%胰蛋白酶+0.02%EDTA

異丙醇

所需耗材：

離心管（15ml、50ml）

T-25 細胞培養瓶

一次性無菌移液管（2ml、5ml、10ml）

8ml 凍存管

程序降溫盒

操作步驟：

將需要那凍存的細胞從 CO2培養箱中取出，在生物安全柜內，打開培養瓶瓶口，

吸棄瓶內的培養基；

向培養內加入無菌 1×PBS 3ml，之后水平放置培養瓶，旋轉震蕩培養瓶，使 PBS

能夠浸潤到培養平面上所都的面積，吸棄 PBS；

重復步驟 2 一次，之后向瓶內加入消化液 1ml，輕微震蕩后放入 37℃CO2培養

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使用經驗（*供參考）：雖然梯度降溫的起始點是室溫20°左右，但是凍存液里面的DMSO對細胞0性，尤其是室溫的時候，所以凍存盒和凍存液先預放至4°，等把細胞用凍存液重懸好了放入凍存盒后，立刻轉移到-80度冰箱，第二天再轉移到液氮。凍存盒中的異丙醇應使用5~7此后更換一次，而且保證液體量不低于250ml刻度線，否則降溫效果會受到影響。異丙醇：無色透明具有乙醇氣味的可燃性、0液體，熔點是-87.9度。請注意其可燃性!杭州科默斯科技有限公司

品名：梯度降溫盒 、程序降溫盒、細胞凍存盒貨號：美國Nalgene程序降溫盒5100-0001用途：細胞凍存、細胞復蘇產品規格：18孔可放凍存管：1ml、1.2ml、1.5ml、2ml凍存盒尺寸：高度86mm，直接117mm易于使用，只需要***異丙醇和機械冷凍設備本產品采用聚碳酸脂（PC）盒體，藍色高密度聚乙烯（HDPE）蓋，白色高密度聚乙烯（HDPE）管槽，泡沫襯墊。可實現每分鐘1℃降溫，提高凍存細胞的存活率，從冰箱拿出來后，泡沫內襯及異丙醇也可保證逐步升溫，故也可用于細胞復蘇。用之前在盒夾層內注入***濃度的異丙醇，管槽可放置1-2ml凍存管或儲液管18個，同時管槽支架可防止管子與酒精接觸，以防由于毛細作用而造成污染，或弄掉標簽。細胞凍存有兩種方法：傳統的方法是利用冷存管處于4℃、 -20℃、 -80℃保存，程序降溫方法是利用程序降溫盒設定程序由室溫降低至-80℃，后再放置到液氮槽中長期保存。杭州科默斯科技有限公司誠信履約,互相幫助。

經驗4：應該不可以把凍存盒放4°的，因為梯度降溫的起始點是室溫20°左右，所以從-80℃拿出來的凍存盒應該現在室溫靜置一段時間待其恢復到室溫再使用。而其中的異丙醇應使用6~7此后更換一次，而且保證液體量達到刻度線，否則降溫效果會受到影響。經驗5：凍存盒里的異丙醇一般是250ml，低于刻度了要加上，理論上是5次以后更換異丙醇，但是異丙醇對環境有害，我們可以多用幾次，只是少了的時候要加滿。還有凍存液里面的DMSO對細胞0性，尤其是室溫的時候，所以凍存盒和凍存液先放4°，等把細胞用凍存液重懸好了放在凍存盒里，還放回4°，等到出細胞間的時候再拿到-80°里面保存。過夜再轉入液氮。程序降溫盒這個梯度降溫可提高細胞凍存的存活率，由于程序降溫盒內存在***濃度的異丙醇和泡沫內襯，因此程序降溫盒也可以用于細胞復蘇。杭州科默斯科技有限公司始于**需要，終于人民滿意。河南科默斯凍存盒多少錢

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箱中孵育 2-4min；

孵育完成后在倒置顯微鏡下觀察細胞是否變圓飄起，如還有部分細胞為消化下

可在生物安全柜內用移液管吸起消化液，吹打培養平面；

向消化下細胞的培養瓶中加入 1ml 含血清的完全培養基終止消化，然后將培養

瓶中的液體轉入 15ml 離心管中，300g 離心 5min；

離心完成后，棄上清，用 0.5mlFBS 重懸細胞，再加入 0.5ml 凍存液，用移液

管充分混勻，之后轉入 1.8ml 凍存管中；

將凍存管轉入填充滿異丙醇的程序降溫盒中，之后轉入-80℃冰箱中過夜降溫；

第二天，取出降溫完成的序降溫盒中的凍存管，盡快轉入液氮罐中保存。 浙江低溫凍存盒多少錢

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