病理切片的制作需要取一定大小的病變組織，用病理組織學(xué)方法制成病理切片〔通常將病變組織包埋在石蠟塊里，用切片機(jī)切成薄片，再用蘇木精-伊紅(H-E)染色〕，上海病理切片總代理,用顯微鏡進(jìn)一步檢查病變。 病變的發(fā) 展過(guò)程，***作出病理診斷。 病理切片的制作 1.制作病理切片取材 (1)材料新鮮:取材組織愈新鮮愈好，人體組織一般在離體后，動(dòng)物組織在處死后迅速固定，上海病理切片總代理，以保證原有的形態(tài)學(xué)結(jié)構(gòu)。 (2)組織塊的大小:所取組織塊較理想的體積為2.0cm×2.0cm×0.3cm，以使固定液能迅速而均勻地滲入組織內(nèi)部，但根據(jù)制片材料和目的不同，組織塊的較理想體積也不同，上海病理切片總代理，如制作病理外檢、科研切片，其組織塊可以薄取0.1~0.2cm即可，這樣可以縮短固定脫水透明的時(shí)間，若制作教學(xué)切片厚取0.3 ~0.5cm，這樣可以同一蠟塊制作出較多的教學(xué)切片。 (3)勿擠壓組織塊: 切取組織塊用的刀剪要鋒利，切割時(shí)不可來(lái)回銼動(dòng)。夾取組織時(shí)切勿過(guò)緊，以免因擠壓而使組織、細(xì)胞變形。 (4)規(guī)范取材部位: 要準(zhǔn)確地按解剖部位取材，病理標(biāo)本取材按照各病變部位、性質(zhì)的不同，根據(jù)要求規(guī)范化取材。上海病理切片總代理

制作組胚病理切片保持材料的清潔:組織塊上如有血液、污物、粘液、食物、糞便等，可用水沖洗干凈后再放入固定液中。 保持組織的原有形態(tài):新鮮組織固定后，或多或少會(huì)產(chǎn)生收縮現(xiàn)象，有時(shí)甚至完全變形。為此可將組織展平，以盡可能維持原形。 制作病理切片固定 (1)小塊組織固定法:這是相當(dāng)常用的方法，從人體或動(dòng)物體取下的小塊組織，須立即置入液態(tài)固定劑中進(jìn)行固定，通常，標(biāo)本與固定液的比例為1:4~20，但組織塊不宜過(guò)大過(guò)厚，否則固定液不能迅速滲透。故取組織塊的大小一般為2.0cm×2.0cm×0.3cm。 (2)注射、灌注固定法:某些組織塊由于體積過(guò)大或固定液極難滲入內(nèi)部，或需要對(duì)整個(gè)臟器或整個(gè)動(dòng)物體進(jìn)行固定。這時(shí)宜采用注射固定或灌注固定法。將固定液注入血管，經(jīng)血管分支到達(dá)整個(gè)組織和全身，從而得到充分的固定。 (3)蒸汽固定法:比較小而厚的標(biāo)本，可采用鋨酸或甲醛蒸汽固定法。如血液涂片，則應(yīng)在血片未干燥前采用鋨酸或甲醛蒸汽接觸固定。 相當(dāng)常用的固定液有10%甲醛固定液和95%乙醇固定液。上海病理切片總代理

制作病理切片染色和封片 常用的染色方法是蘇木素-伊紅(Hematoxylin-Eosin)染色法，簡(jiǎn)稱H.E染色法。這種方法對(duì)任何固定液固定的組織和應(yīng)用各種包埋法的切片均可使用。蘇木素是一種堿性染料,可使組織中的嗜堿性物質(zhì)染成藍(lán)色，如細(xì)胞核中的染色質(zhì)等;伊紅是一種酸性染料，可使組織中的嗜酸性物質(zhì)染成紅色，如多數(shù)細(xì)胞的胞質(zhì)、核仁等在H.E染色的切片中均呈紅色。 H.E染色程序如下:脫蠟、脫苯、復(fù)水、染色、脫水、透明、封固 常規(guī)蘇木素染色中的對(duì)比染色是用伊紅,近年來(lái)在英、美家的一些實(shí)驗(yàn)室則采用焰紅(phloxine),此外也有用桔黃G(OrangeG)、比布里希猩紅(Biebrich scarlet)、波爾多紅(Bordeaux red)等作為對(duì)比染色。伊紅為染胞質(zhì)、膠原纖維、肌纖維、嗜酸性顆粒等常用的染料。

制作病理切片脫水透明 標(biāo)本經(jīng)過(guò)固定和沖洗后，組織中含有較多的水分，必須將組織塊內(nèi)的水分置換出來(lái)，這一過(guò)程叫做脫水。無(wú)論是用石蠟切片，還是用火棉膠切片，都必須除去組織中所含水分，因含水組織與石蠟、火棉膠等包埋材料不相容，常用的脫水劑為一系列不同濃度的乙醇。 脫水的步驟是:80%、90%、95%各種濃度乙醇2小時(shí)，此過(guò)程可用脫水機(jī)自控完成。 **也是一種脫水能力很強(qiáng)的脫水劑，但因其脫水能力很強(qiáng)，對(duì)組織有劇烈收縮作用，在制作科研、教學(xué)切片時(shí)一般不用該試劑。因乙醇、**等不溶于石蠟，還要經(jīng)過(guò)一個(gè)能溶于石蠟的溶劑替代過(guò)程稱為透明。常用的透明劑有二甲苯、三氯甲烷、水楊酸甲酯等。

病理切片制作時(shí)將部分有病變的組織或臟器經(jīng)過(guò)各種化學(xué)品和埋藏法的處理，使之固定硬化，在切片機(jī)上切成薄片，粘附在玻片上，染以各種顏色，供在顯微鏡下檢查，以觀察病理變化，作出病理診斷。 病理切片操作規(guī)范： 一、巨檢結(jié)束后點(diǎn)清塊數(shù)，記錄簽收。 二、組織包埋完成后進(jìn)行清點(diǎn)蠟塊數(shù)量。 三、大標(biāo)本固定時(shí)間不得少于6小時(shí)；小標(biāo)本不得少于3小時(shí)。 四、固定液必須及時(shí)更換，固定后必須流水沖洗。 五、固定、脫水溫度不得高于37℃。 六、包埋用石蠟必須過(guò)濾。 七、試劑必須及時(shí)更換。 八、切片刀必須鋒利，用力均勻，切片厚度3—5微米。切片完整無(wú)污染，無(wú)皺褶。 九、胃鏡、穿刺等小活檢組織切片必須作連續(xù)性切片，數(shù)量不得少于8張。 十、組織片貼附，應(yīng)在除去標(biāo)簽位置后玻片的中間。 十一、封固前必須經(jīng)酒精充分脫水，二甲苯透明，濕封。 十二、封片時(shí)不得有氣泡，不得有樹(shù)膠外溢。 十三、標(biāo)簽必須貼于玻片左側(cè)，編號(hào)字跡必須清楚。 十四、取材后的制片工作一般應(yīng)在2個(gè)工作日內(nèi)完成。 十五、切片完成后交付醫(yī)師時(shí)必須按照記錄當(dāng)面清點(diǎn)重慶病理切片定制

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