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***更新:2020-12-04 01:07:34
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詳細說明
傳統的寡核苷酸合成一般稱為柱式合成,基于四步法亞磷酰胺化學合成方法(Froehler,Matteucci, 1983),在固相上進行寡核苷酸合成,天津操作性能好基因合成儀廠家,現在仍被大多商業化DNA合成公司所采用。
該過程將酸活化的脫氧核苷亞磷酰胺分子耦合到一個固定在固相(一般是硅材質表面)的脫氧核苷酸分子上。在***個合成循環中,天津操作性能好基因合成儀廠家,核苷酸鏈從***個固定在表面上受保護的核苷酸分子開始延伸,天津操作性能好基因合成儀廠家。其中,經常采用的固定化表面主要是可控孔度玻璃( CPG)或者聚苯乙烯微珠(PS beads)。試劑被泵入
對于閥塊的適當運行,關鍵是隔膜形成一個圓頂小空隙。天津操作性能好基因合成儀廠家
PSI200多通道多肽合成儀1.技術參數通道數3或6通道反應器10ml、20ml或40ml合成規模試劑儲罐4個500ml溶劑儲罐(標準配置)1個30L、1個2L、2個500ml試劑儲罐(與PSI400D匹配)反應器攪拌模式180度或270度上下翻轉的無死角機械攪拌模式反應器攪拌速度無極可調反應器攪拌強度無極可調合成樹脂攪拌不傷樹脂合成過程全程氮氣保護合成方式Fmoc/tBoc活化方式預活化、沉淀活化和非沉淀活化合成步驟4至6步即可完成氨基酸的合成耦合效率耦合效率可達99%以上主要特點:1.耦合效率高?0度-180度機械上下轉動混合,反應徹底無死角,樹脂無損壞且完全參加反應,平均氨基酸的耦合率都在99%以上;?與氮氣鼓泡式、頂置式、搖床、鐘擺式、渦旋式等攪拌方式相比180度上下翻轉效果zui佳;?很多多肽科學家手工試驗證明:180度機械攪拌方式是多肽合成的zui佳方式。2.零耗材設計?運行費用幾乎為零;?儀器內部管路和反應器都采用了316L不銹鋼過濾膜,永jiu不需更換;?試劑儲罐采用實驗室通用器材,客戶可方便且便宜地買到;3.程序簡單完美,是多肽合成儀中**為優化的一種?指令程序編制模塊化人性化,可以方便地對每一參數進行調整,甚至重新編排,方便使用者學習、編輯、修改和運行。上海進口基因合成儀廠家直供閥塊控制氣體和化學試劑流入柱子及出口。除亞磷酰胺和四唑以外,試劑和溶劑都被同時輸送到所有活化柱。
DNA合成儀設計用于合成結構上類似DNA或RNA的寡核苷酸的自動化儀器。一般應用于固相合成法,每次將一個核苷酸加到所接長的寡核苷酸鏈上,加入每一個核苷酸都利用相同的化學反應與相應的嘌呤或嘧啶堿基衍生物作用。所用化學反應和操作細節隨不同的儀器而改變,**廣泛應用的方法是DNA合成的磷酸酰胺法。中文名DNA合成儀目錄1結構和性能2操作步驟3日常維護4特點與性能5發展DNA合成儀結構和性能編輯試劑驅動系統一般地,DNA合成儀采用一定壓力的惰性氣體(氬氣)或氮氣及電磁閥組驅動液體試劑,也可采用氦氣驅動試劑。某些合成儀采用sliderblock滑塊系統及精密蠕動泵,可不采用氣體為驅動系統。采用氣體及電磁閥驅動液體試劑時,需首先將管路系統電磁閥前段,含試劑瓶組中壓力加壓到規定氣壓,通過合成管理軟件或手動打開電磁閥(一般打開時間為數ms),即可驅動液體試劑到所需的合成柱中。試劑和堿基瓶組DNA合成儀一般需堿基瓶組及試劑瓶組。試劑瓶組一般**少為6個,含脫保護劑(Deb)、活化劑(act)、蓋帽試劑A(capA)、蓋帽試劑B(capB)、氧化劑(OXI)及洗脫乙腈(),每種儀器一般都多設置1-2個試劑瓶位,用于特殊產物的合成。堿基瓶組一般**少為4個標準堿基(A/C/G/T)。
路節流閥試劑通過底部的luer接頭,流到柱子,如果沒擰上下面的一個luer接頭,應會在一個圓柱形的玻璃流路節流閥上發現。試劑通過流路節流閥中一個很小的通道流到柱子。小量的試劑可以在流路節流閥中結晶,長期這樣會造成流路阻塞。廢液和排氣大多數化學試劑輸送的**終點是廢液瓶,廢液瓶是一個空立著的10L的聚苯乙烯容器,可放在合成儀附近的地板上或放在低于儀器的附近工作臺上。排氣管將廢氣導入適當的排氣裝置,如排煙罩電導池電導流動池是為了測定在每個DNA合成循環內釋放的DMT陽離子的總電導而設計的。流動池是由一空隙隔開的兩個電極組成,在空隙之間應用一小電壓。DMT陽離子流過電導池時起電導作用。電池它也控制用于除去或沖洗柱內和柱閥塊內的試劑的氬氣。
從 2011 年開始的酵母基因組合成計劃(Sc2.0),當前已經完成了 2、3、5、6、10 和 12 號染色體的合成,其中中國科學家做出了重大貢獻。DNA的合成與組裝未來的發展也許會包括復雜的微生物群落或細胞組織的從頭建立。
三 寡核苷酸的設計和合成流程
一條基因序列的合成起始于寡核苷酸的設計和化學合成,通過各種組裝策略得到0.3-0.5 kb左右的短片段,再進行1-2 kb基因長度DNA序列的組裝。
合成具有復雜結構的基因甚至基因組水平DNA時,合理的設計是關鍵。靶序列通常需要通過軟件從頭設計,包括密碼子優化、DNA二級結構調整以及其他可能影響系統功能(如蛋白表達)的一系列理性設計。
入口和出口都是母路厄氏(1uer)接頭,與儀器的公路厄氏接頭配對。天津進口基因合成儀銷售
正常的流路是從底部進入,通過向上輸送液體,使CPG顆粒上升并保持懸浮狀態。天津操作性能好基因合成儀廠家
壓力管路及輸送管路DNA合成儀的一般原則需要保持內外氣體隔絕,因此無論試劑瓶、堿基瓶均需密封保持一定壓力。所有壓力管路均采用特氟龍導管,直徑為1/16—1/8吋。每個瓶子都有一個氬氣壓力管道及輸送管道進入瓶蓋插塞,對于亞磷酰胺,1—8號瓶其壓力管道也作為排氣管。氬氣管要保持在液體水平以上,而輸送管卻伸到瓶的底部。當閥門正確設置打開時,儲液瓶上部空間由氬氣加壓,液體被推進輸送管,流到其目的地。亞磷酰胺瓶排氣除了加壓外,亞磷酰胺瓶都是用壓力排氣管排氣的。把亞磷酰胺放入儀器前,要用氬氣排除空氣使其凈化。凈化是通過輸送管輸送氣體,當氣體輸送到瓶內時,空氣經壓力排氣管排出。這是由瓶子更換步驟自動完成的。廢液瓶是輸送系統的低壓側,必須將出口與大氣相通。要確保排氣管通到通風柜。如果排氣管阻塞,將會產生反壓,試劑和溶劑的輸送會受到抑制。 天津操作性能好基因合成儀廠家
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