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***更新:2020-12-24 02:13:02
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詳細說明
糖原染色法:染色原理細胞胞漿中存在糖原或多糖類物質(如糖蛋白、粘多糖,提供糖原染色試劑盒推薦廠家、糖脂、粘蛋白等),過碘酸能使細胞內的多糖乙二醇基氧化為二醛基,其與Schiff試劑中的無色品紅結合后呈現紫紅色,沉積在細胞內多糖所在之處。染色步驟:1.組織石蠟包埋切片后脫蠟至水,蒸餾水洗2min(細胞爬片4%多聚甲醛固定后水洗);2.滴加過碘酸溶液,氧化5min;3.蒸餾水洗10min;4.滴加Schiff試劑,侵染10-20min;5.傾去Schiff 試劑,流水沖洗10min;6.滴加蘇木素染色液,提供糖原染色試劑盒推薦廠家,提供糖原染色試劑盒推薦廠家,染核1-2min;7.流水沖洗5min;8.酸性乙醇分化液分化。該依據切片厚薄、組織的類別等決定。提供糖原染色試劑盒推薦廠家
糖原染色――檢查項目的注意細節:其判斷標準隨細胞不同而異,一般分為5級,即0~4級。糖原染色――檢查項目的一般步驟:(1)新鮮干燥血片或骨髓片于95%乙醇中固定10min,蒸餾水沖洗數次,待干。(2)浸入10g/L過碘酸水溶液中10min,蒸餾水沖洗數次,待完全干燥。(3)放入雪夫液30min,用自來水沖洗約5min,再用蒸餾水沖洗,然后用20g/L甲基綠復染20min,水洗,晾干。糖原染色――檢查項目結果解讀:(1)新鮮干燥血片或骨髓片于95%乙醇中固定10min,蒸餾水沖洗數次,待干。(2)浸入10g/L過碘酸水溶液中10min,蒸餾水沖洗數次,待完全干燥。(3)放入雪夫液30min,用自來水沖洗約5min,再用蒸餾水沖洗,然后用20g/L甲基綠復染20min,水洗,晾干。江蘇口碑好的糖原染色試劑盒切出的石蠟切片要好,不能有皺褶或者刀痕,切片不能太厚。
糖元染色試劑盒細胞生物學研究有以下幾個方面。細胞生物學的研究內容十分普遍,主要包括。①細胞核、染色體以及基因表達的研究。②生物膜與細胞器的研究。③細胞骨架體系的研究。④細胞增殖及其調控。⑤細胞分化及其調控。⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡)⑦細胞的起源與進化。⑧細胞工程。PAS染色,全稱過碘酸雪夫染色(Periodic Acid-Schiff Stain),主要用來顯示糖原和其他多糖物質,因此也稱作糖原染色。另外,此染色方法還可以顯示中性黏液性物質和某些酸性物質,以及軟骨、垂體、色素、淀粉樣物質、基底膜、霉菌等。PAS法的檢測原理在于:過碘酸(也成為高碘酸)是一種強氧化劑。
特染的應用價值:現代病理學中免疫組織化學技術、電子顯微鏡技術以及其它細胞及分子生物學技術應用日益普遍,但由于這些技術要求一定的實驗條件以及所需的試劑價格較為昂貴,對于一部分病人以及某一些基層醫院是比較難以接受的。而組織化學技術則具有無需復雜的實驗條件以及較為昂貴的試劑操作又比較簡單的優勢,在臨床病理學診斷中具有重要的應用價值。比如,當細胞中出現色素,是黑色素還是含鐵血黃素以及當組織中出現均一化學物質是否為淀粉樣變性等,用組織化學技術區別起來很簡單,所以組織化學技術,雖然已有幾十年到幾百年的歷史,仍是一個很有實用價值的技術。可將胰酶消化后細胞的保存在含2%BSA的PBS中,防止進一步的損傷。
糖類染色實驗——糖原染色:高碘酸氧化液:高碘酸 0.5 g,蒸餾水 100 ml。此液溶解后放入冰箱中待用。Schiff 染色液:堿性復紅 1 g,1mol/L 鹽酸 20 ml,焦亞硫酸鈉(偏重亞硫酸鈉)2 g,雙重蒸餾水 200 ml。先將 200 ml 雙重蒸餾水煮沸,稍有火焰,加入 1 g 堿性復紅,再煮沸 1 min,冷卻至 50℃ 加入 20 ml1mol/L 鹽酸,待 35℃ 時加入 2 g 焦亞硫酸鈉。室溫中 2 h 之后見稍帶紅色,5 h 之后變為無色液體。棕色瓶內裝好,放入冰箱中保存待用。1. 石蠟組織切片,常規脫蠟至水。2. 蒸餾水洗 2 次。3. 高碘酸氧化液處理 10~20 min。4. 充分蒸餾水洗。5. Shciff 液染色,染色 10~20 min(如果室溫在 15℃ 以下時,可在濕盒內加入溫水而加快反應)。6. 流水沖洗 3 min(對于著色較深的切片可適當縮短時間)。7. 用 Mayer 明礬-蘇木**染細胞核 3~5 min。8. 0.5% 鹽酸乙醇液分化 30s,自來水浸洗 2 min。急性單核細胞白血病原、幼單核細胞POX染色多呈細小顆粒弱陽性反應。提供糖原染色試劑盒推薦廠家
如用無水酒精作糖原的固定劑,有它的弊病。提供糖原染色試劑盒推薦廠家
臨床意義:1.急性白血病類型的鑒別 紅白血病的幼紅細胞PAS染色多呈陽性反應,陽性率高,反應強;成熟紅細胞有時亦可為陽性;急性淋巴細胞白血病的原、幼淋巴細胞PAS染色多為紅色顆粒或塊狀陽性反應;急性粒細胞白血病的原粒細胞呈陰性或胞質呈彌漫淡色陽性反應;急性早幼粒細胞白血病 異常早幼粒細胞的PAS染色為陽性反應;急性單核細胞白血病原、幼單核細胞PAS染色陽性反應呈彌漫分布的紅色細顆粒,巨核細胞白血病原巨核細胞PAS染色呈陽性或強陽性反應,表現為紅色顆粒或塊狀。2.各類貧血的鑒別 MDS、缺鐵性貧血、珠蛋白生成障礙性貧血(曾稱地中海貧血)的幼紅細胞PAS染色多為陰性反應,有時可出現陽性反應;巨幼紅細胞貧血、溶血性貧血、再障的幼紅細胞PAS染色為陰性。提供糖原染色試劑盒推薦廠家
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