制作病理切片脫水透明 標本經過固定和沖洗后，組織中含有較多的水分，必須將組織塊內的水分置換出來，這一過程叫做脫水。無論是用石蠟切片，還是用火棉膠切片，都必須除去組織中所含水分，因含水組織與石蠟、火棉膠等包埋材料不相容，常用的脫水劑為一系列不同濃度的乙醇。 脫水的步驟是:80%、90%、95%各種濃度乙醇2小時，此過程可用脫水機自控完成。 **也是一種脫水能力很強的脫水劑，但因其脫水能力很強，對組織有劇烈收縮作用，陜西病理切片生產廠家，在制作科研，陜西病理切片生產廠家、教學切片時一般不用該試劑。因乙醇、**等不溶于石蠟，還要經過一個能溶于石蠟的溶劑替代過程稱為透明，陜西病理切片生產廠家。常用的透明劑有二甲苯、三氯甲烷、水楊酸甲酯等。陜西病理切片生產廠家

病理切片制作時將部分有病變的組織或臟器經過各種化學品和埋藏法的處理，使之固定硬化，在切片機上切成薄片，粘附在玻片上，染以各種顏色，供在顯微鏡下檢查，以觀察病理變化，作出病理診斷。 病理切片操作規范： 一、巨檢結束后點清塊數，記錄簽收。 二、組織包埋完成后進行清點蠟塊數量。 三、大標本固定時間不得少于6小時；小標本不得少于3小時。 四、固定液必須及時更換，固定后必須流水沖洗。 五、固定、脫水溫度不得高于37℃。 六、包埋用石蠟必須過濾。 七、試劑必須及時更換。 八、切片刀必須鋒利，用力均勻，切片厚度3—5微米。切片完整無污染，無皺褶。 九、胃鏡、穿刺等小活檢組織切片必須作連續性切片，數量不得少于8張。 十、組織片貼附，應在除去標簽位置后玻片的中間。 十一、封固前必須經酒精充分脫水，二甲苯透明，濕封。 十二、封片時不得有氣泡，不得有樹膠外溢。 十三、標簽必須貼于玻片左側，編號字跡必須清楚。 十四、取材后的制片工作一般應在2個工作日內完成。 十五、切片完成后交付醫師時必須按照記錄當面清點北京病理切片生產商

病理切片的制作需要取一定大小的病變組織，用病理組織學方法制成病理切片〔通常將病變組織包埋在石蠟塊里，用切片機切成薄片，再用蘇木精-伊紅(H-E)染色〕,用顯微鏡進一步檢查病變。 病變的發展過程，***作出病理診斷。 病理切片的制作 1.制作病理切片取材 (1)材料新鮮:取材組織愈新鮮愈好，人體組織一般在離體后，動物組織在處死后迅速固定，以保證原有的形態學結構。 (2)組織塊的大小:所取組織塊較理想的體積為2.0cm×2.0cm×0.3cm，以使固定液能迅速而均勻地滲入組織內部，但根據制片材料和目的不同，組織塊的較理想體積也不同，如制作病理外檢、科研切片，其組織塊可以薄取0.1~0.2cm即可，這樣可以縮短固定脫水透明的時間，若制作教學切片厚取0.3 ~0.5cm，這樣可以同一蠟塊制作出較多的教學切片。

制作病理切片浸蠟、包埋 (1)使石蠟浸入組織中，取代組織中含有的透明劑。 (2)包埋:將浸蠟后的組織置于融化的固體石蠟中，石蠟凝固后，組織即被包在其中，稱蠟塊，此過程稱為包埋。 5.制作病理切片切片和貼片 (1)修整蠟塊:可視其組織的大小，在組織邊緣約0.1~0.2cm處，切去余蠟部分，否則易造成組織皺縮不平。 (2)準備好切片用具:切片刀、毛筆、眼科鑷子(彎)、漂烘溫控儀 (3)安裝蠟塊:將修好的蠟塊安裝在金屬或木制持蠟器上。 (4)安裝切片刀:將切片刀安裝在切片機的刀臺上，把刀臺上的緊固螺絲旋緊，使切片時不產生振動，能保持一定的切片厚度。 (5)切片的厚度:切片機的厚度調節器上刻有0~50μm或0~25μm，可任意選擇其厚度，石蠟切片的厚度一般在4~6μm。 (6)切片 (7)鋪片:用眼科鑷子鑷起蠟帶輕輕平鋪在40~45℃的水面上，借水的張力和水的溫度，將略皺的蠟帶自然展平。 (8)貼片、烘片:待切片在恒溫水面上充分展平后，將蠟片撈到載玻片的中段處傾去載玻片上的余水，置入60~65℃恒溫箱內或切片漂烘溫控儀的烘箱內烤片15~30分鐘，脫去溶化組織間隙的石蠟。

制作病理切片染色和封片 常用的染色方法是蘇木素-伊紅(Hematoxylin-Eosin)染色法，簡稱H.E染色法。這種方法對任何固定液固定的組織和應用各種包埋法的切片均可使用。蘇木素是一種堿性染料,可使組織中的嗜堿性物質染成藍色，如細胞核中的染色質等;伊紅是一種酸性染料，可使組織中的嗜酸性物質染成紅色，如多數細胞的胞質、核仁等在H.E染色的切片中均呈紅色。 H.E染色程序如下:脫蠟、脫苯、復水、染色、脫水、透明、封固 常規蘇木素染色中的對比染色是用伊紅,近年來在英、美家的一些實驗室則采用焰紅(phloxine),此外也有用桔黃G(OrangeG)、比布里希猩紅(Biebrich scarlet)、波爾多紅(Bordeaux red)等作為對比染色。伊紅為染胞質、膠原纖維、肌纖維、嗜酸性顆粒等常用的染料。北京病理切片生產商

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