品名：梯度降溫盒 、程序降溫盒、細胞凍存盒貨號：美國Nalgene程序降溫盒5100-0001用途：細胞凍存、細胞復蘇產品規格：18孔可放凍存管：1ml、1.2ml、1.5ml、2ml凍存盒尺寸：高度86mm，直接117mm易于使用，只需要***異丙醇和機械冷凍設備本產品采用聚碳酸脂（PC）盒體，藍色高密度聚乙烯（HDPE）蓋，白色高密度聚乙烯（HDPE）管槽，泡沫襯墊。可實現每分鐘1℃降溫，提高凍存細胞的存活率，從冰箱拿出來后，泡沫內襯及異丙醇也可保證逐步升溫，故也可用于細胞復蘇。用之前在盒夾層內注入***濃度的異丙醇，廣東科默斯凍存盒批發，管槽可放置1-2ml凍存管或儲液管18個，同時管槽支架可防止管子與酒精接觸，以防由于毛細作用而造成污染，廣東科默斯凍存盒批發，或弄掉標簽。細胞凍存有兩種方法：傳統的方法是利用冷存管處于4℃、 -20℃、 -80℃保存，程序降溫方法是利用程序降溫盒設定程序由室溫降低至-80℃，廣東科默斯凍存盒批發，后再放置到液氮槽中長期保存。杭州科默斯科技有限公司奮力拼搏、精益求精。廣東科默斯凍存盒批發

請問梯度凍存盒到底怎么使用？兩種方法：

是先把凍存盒放在室溫，把細胞放在凍存盒，置于-80度？（這樣的好處：細胞可以從室溫開始緩慢降溫）（并且，據說凍存盒的使用本來就是從20度室溫開始降）

還是將凍存盒先放在4度降溫，再將細胞放進去，放于-80？（這樣的好處：常溫下凍存液中DMSO對細胞損傷大，從4度開始降溫比較好？）用液氮凍存細胞是醫學、生物學等研究領域常用的技術，目前國內實驗室液氮中存放的凍存盒通常為不透明的盒體，在盒體內設置有多個隔板，形成能插入多個管瓶的空間，能夠儲藏多個細胞樣品。但是現有的細胞凍存盒，保溫效果差，在運輸過程中冷氣快速流失造成細胞的變質，同時凍存管擺放架只可擺放單一結構的凍存試管，功能性弱，并且凍存管擺放架的高度不可調節，無法針對不同高度的凍存試管進行保存。針對上述問題，急需設計一種新型的細胞凍存盒。技術實現要素：本實用新型的目的在于提供一種細胞凍存盒，以解決上述背景技術中提出現有的細胞凍存盒，保溫效果差，在運輸過程中冷氣快速流失造成細胞的變質，同時凍存管擺放架只可擺放單一結構的凍存試管，功能性弱，并且凍存管擺放架的高度不可調節，無法針對不同高度的凍存試管進行保存的問題。 廣東科默斯凍存盒批發杭州科默斯科技有限公司杜絕不良思想，發揚質量精神。

經驗4：應該不可以把凍存盒放4°的，因為梯度降溫的起始點是室溫20°左右，所以從-80℃拿出來的凍存盒應該現在室溫靜置一段時間待其恢復到室溫再使用。而其中的異丙醇應使用6~7此后更換一次，而且保證液體量達到刻度線，否則降溫效果會受到影響。經驗5：凍存盒里的異丙醇一般是250ml，低于刻度了要加上，理論上是5次以后更換異丙醇，但是異丙醇對環境有害，我們可以多用幾次，只是少了的時候要加滿。還有凍存液里面的DMSO對細胞0性，尤其是室溫的時候，所以凍存盒和凍存液先放4°，等把細胞用凍存液重懸好了放在凍存盒里，還放回4°，等到出細胞間的時候再拿到-80°里面保存。過夜再轉入液氮。程序降溫盒這個梯度降溫可提高細胞凍存的存活率，由于程序降溫盒內存在***濃度的異丙醇和泡沫內襯，因此程序降溫盒也可以用于細胞復蘇。

Biosharp程序降溫盒不需要添加任何醇類液體，可在-80℃的冰箱條件下，為細胞提供-1℃每分的降溫速率，滿足多數細胞凍存的較好條件。該程序降溫盒采用高級聚乙烯泡沫材料制成，內含合金內芯，對凍存環境沒有影響，不會影響周圍其他凍存樣品。細胞凍存效果一致且實驗重復性好。

特點:

- 使用方便

- 無需醇類液體進行冷凍

- 后續使用成本較低

- 更好的細胞活力

- 實驗重復性好

使用方法：

將需要裝有細胞的凍存管放入室溫存放的程序降溫盒內，蓋上降溫盒蓋。

將程序降溫盒放入-80℃冰箱，冷凍4小時以上以達到凍存效果。

取出程序降溫盒，迅速將凍存管移至液氮環境儲存或進行其他后續操作。

使用后將程序降溫盒置于室溫環境，待程序降溫盒及合金內芯恢復至室溫后備用。

注意事項：

放入冰箱前請保證金屬圈是平躺在盒底的，且蓋子是蓋住的。

放入冰箱后避免與其他物質緊挨，務必保證周圍有2.5cm間隙。

閑置時請置于干燥與陰涼處，盡量避免60℃以上高溫及紫外光線。

強烈建議凍存后檢查細胞活性后，再終止原始細胞株的培養。 杭州科默斯科技有限公司期待著與志同道合的同仁精誠合作。

箱中孵育 2-4min；

孵育完成后在倒置顯微鏡下觀察細胞是否變圓飄起，如還有部分細胞為消化下

可在生物安全柜內用移液管吸起消化液，吹打培養平面；

向消化下細胞的培養瓶中加入 1ml 含血清的完全培養基終止消化，然后將培養

瓶中的液體轉入 15ml 離心管中，300g 離心 5min；

離心完成后，棄上清，用 0.5mlFBS 重懸細胞，再加入 0.5ml 凍存液，用移液

管充分混勻，之后轉入 1.8ml 凍存管中；

將凍存管轉入填充滿異丙醇的程序降溫盒中，之后轉入-80℃冰箱中過夜降溫；

第二天，取出降溫完成的序降溫盒中的凍存管，盡快轉入液氮罐中保存。 杭州科默斯科技有限公司供應專業更專注，品高質更強。甘肅程序凍存盒生產廠家

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凍存盒肯定是先放在室溫，然后放進去細胞，置于-80，利用異丙醇實現梯度降溫啊。)

根據論壇里的討論，異丙醇使用過一段時間后是要更換的，但是我一直沒換過，也沒發現很大問題。

經驗2：我們實驗室凍存盒平時放4度，需要凍細胞時直接拿出來用就可以了。第二天轉移至液氮，貴重的細胞盡快轉移，不然會影響復蘇成活率的。一般是用5次就更換一下異丙醇。現在也有一些商品化凍存液可以直接丟進-80的，很方便，效果也不錯的。

經驗3：異丙醇的量是要保證的，不能低于表明的線，否則不能起到很好的程序性降溫作用，我們是在4度放置，放了細胞后立馬放到-80度冰箱，第二天再轉移到液氮，效果很不錯。異丙醇熔點：-87.9度的色透明具有乙醇氣味的可燃性0液體。注意了有可燃性!急性毒性：口服- 大鼠 LD50: 5840 毫克/ 公斤; 口服- 小鼠 LC50: 3600 毫克/ 公斤。刺激數據：眼睛- 兔子100 毫克/ !請注意清理!

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杭州科默斯科技有限公司致力于商務服務，以科技創新實現***管理的追求。杭州科默斯科技深耕行業多年，始終以客戶的需求為向導，為客戶提供***的程序降溫盒，梯度降溫盒，無冰工作站，低溫工作站。杭州科默斯科技繼續堅定不移地走高質量發展道路，既要實現基本面穩定增長，又要聚焦關鍵領域，實現轉型再突破。杭州科默斯科技始終關注商務服務行業。滿足市場需求，提高產品價值，是我們前行的力量。

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